YY/T 0506.6、ENISO 22610

　　1.转盘速度：60rpm±1rpm；

　　2.试验压力：3N±0.02N；

　　3.外向轮转速：5～6rpm；

　　4.定时器设定范围：0～99.99min；

　　5.内外环砝码总重：800g±1g。

　　金黄色葡萄球菌ATCC29213在胰酶大豆琼脂上36℃±1℃下培养18-24h，将2-3个菌落接种至3ml胰酶大豆肉汤中，在36℃±1℃下培养18-24h。用蛋白胨水1：10稀释至浓度为1×104CFU/mL~4×104CFU/mL，对终菌悬液进行计数。

　　打开无菌袋取出仍贴附在智商的聚氨酯膜，将载菌材料片的可浸湿聚氨酯膜面朝上放在洁净度盘子上，为了便于操作，用双面胶带将载菌材料片的四角固定于盘子上。用培养皿盖作为模板在载菌膜上化出一个相应的区域，在该区域涂布1.0ml金黄色葡萄球菌悬浮液，然后将菌片至于56℃干燥大约30min，在干燥期间采用消毒的玻璃涂布器在载菌膜上继续涂布菌悬液，以使菌液均匀分布。

　　将试件放于琼脂培养皿上，一片相同规格的菌片放于试件上面，再盖上一片厚约10微米的高密度聚乙烯膜，用锥形钢环将三层材料(试验材料在下，菌片居中，高密度聚乙烯膜在上面)卡在一起，将此环套件置于转盘上的琼脂培养皿上，试验指以能在整个培养皿表面上移动的方式作用于材料，使材料受到压力和摩擦的综合作用，以此模拟在实际应用过程中屏障材料可能发生的受力情况和湿态条件下的微生物穿透。菌片上的微生物穿透试验材料后会迁移到琼脂培养基表面，通过对琼脂培养皿的培养和菌落计数，可对试验材料的穿透性能进行定量评价。